产品货号:
MT0022
中文名称:
Strong Taq DNA聚合酶
英文名称:
Strong Taq DNA Polymerase
产品规格:
250U|1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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Strong Taq DNA聚合酶与常规Taq DNA polymerase相比,其扩增灵敏度、产量更高、对复杂模板的扩增能力更强。该产品配备的10×HG PCR Buffer 1为Mg2+自调节反应缓冲液,使用该反应液可在宽范围内Mg2+浓度下获得高特异性PCR扩增产物,同时该Buffer系统可允许引物在宽范围温度内进行退火反应,降低非特异性条带的扩增,从而减少PCR的优化次数。应用该酶扩增的PCR产物含有A尾巴,可直接连接入pUC57 Simple TOPO克隆载体。
以λDNA为模板,扩增15kb DNA片段;以人类基因组DNA为模板,扩增8kb DNA片段。
PCR扩增、3'端加尾、DNA测序。
一个活力单位即在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
组分 | 250U | 1000U |
Super Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 50μL | 200μL |
10×HG PCR Buffer 1 | 1mL | 1mL×4 |
保存:-20℃,有效期2年。
图1.应用Strong Taq DNA聚合酶以人基因组为模板分别扩增不同长度DNA片段的效果。
泳道2~3:1150bp;泳道5~6:1760bp;泳道8~9:7480bp;泳道1/4/7为阴性对照
- 按以下组分配制PCR反应液
成分 用量 Strong Taq DNA聚合酶(5U/μL) 0.5μL 10×HG PCR Buffer 1 5μL dNTP Mixture(2.5mM each) 4μL 模板DNA X μL 上游引物(10μM) 2μL 下游引物(10μM) 2μL ddH2O 至50μL - 模板DNA用量(目的片段≤10kb):100~1000ng gDNA,5~30ng质粒DNA,1~2μL cDNA。
- PCR扩增循环参数
循环数 温度 时间 1st Cycle 95℃ 2min 25~35 Cycles 95℃ 10s 50~60℃ 20s 72℃ 2kb/1min Last Cycle 72℃ 5min - 具体程序根据实际扩增情况而定。
- 电泳:1%琼脂糖凝胶电泳,上样5μL,电泳结束在紫外灯下检测条带。
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